LSI Cyclin D1 (Orange)/CEP11 (Green)

« zpět

Umístění sondy na chromozómu

Cyclin-D1

Popis sondy

LSI Cyclin D1 FISH kit je určen k vyšetření amplifikace genu pomocí fluorescenční in situ hybridizace (FISH) v lidské nádorové tkáni.

LSI Cyclin D1 FISH kit obsahuje dvě přímo značené fluorescenční sondy v hybridizačním pufru: LSI Cyclin D1 a centromerickou sondu pro chromozom 11 (CEP11), určenou k enumeraci chromozomu 11. Cyclin D1 próba je značená fluorochromem Orange a pokrývá oblast genu 11q13. Centromerická (alfasatelitní) próba CEP11 je značená fluorochromem Green.

Nádorové buňky mají schopnost procházet buněčným dělením i s poškozením, které by u zdravé buňky vyvolalo programovou buněčnou smrt, apopotózu. Takovéto poškození či nesprávná funkce jednotlivých genů regulujících buněčný cyklus a apoptózu vede k maligní transformaci buňky. Cykliny a cyklin-dependentní kinázy (CDK) tvoří hlavní regulační systémy buněčného cyklu.
Jedním z klinicky nejdůležitějších cyklinů je cyklin D1, jehož gen je lokalizován na chromozomu 11 v oblasti q13 (CCND1 = PRAD1 [Parathyroid Adenomatosis 1] = BCL1      [B-cell Leukemia / Lymphoma]). Cyklin D1 je exprimován především v G1 fázi buněčného cyklu, kde se účastní progrese G1 a přechodu G1 fáze do S-fáze. Exprese tohoto genu neprobíhá například u klidových buněk, například lymfocytů.

Amplifikace či zvýšená exprese cyklinu D1 bývá nalézána u různých typů maligních onemocnění, například u primárního karcinomu prsu (amplifikován až u 15% případů, asi u 40% nalézána vysoká exprese CCND1), ovariálních karcinomů (asi 13% případů s amplifikací CCND1), u hepatocelulárních karcinomů (10% případů s amplifikací), malobuněčného karcinomu plic (amplifikace u 10% případů), hematologických malignit (amplifikace asi u 15% případů), u karcinomů dlaždicovitého epitelu hlavy a krku (amplifikace až u 43% případů) či jícnu (amplifikace asi u 34% případů).

Amplifikací či nadměrnou expresí genu pro cyklin D1 dochází k alteracím v buněčném cyklu, často následovaným dalšími změnami v jeho regulačních mechanismech a tyto změny mohou být součástí kancerogeneze buňky. Potvrzením této teorie je i skutečnost, že právě v invazivních typech nádorových buněk bývá často nalézána vysoká hladina mRNA cyklinu D1.

Výsledky FISH

Pro odlišení pravé amplifikace genu Cyklin D1 od polyzomie chromozomu 11 lze použít směs přímo značených sond LSI Cyclin D1 (Orange) a CEP 11 (Green).

Fyziologický stav genu Cyclin D1 vyšetřeného sondou LSI Cyclin D1 (Orange) a CEP11 (Green) - parafínový řez ca.prsu Amplifikace genu Cyclin D1 vyšetřeného sondou LSI Cyclin D1 (Orange) a CEP11 (Green) - parafínový řez ca.prsu
A B

Obr. 1: Stanovení počtu kopií genu Cyclin D1  a současného počtu kopií chromozómu 11 na parafinových řezech.         
red LSI Cyclin D1 
green CEP11
a) Dvě kopie genu Cyclin D1 i chromozómu 11 v nádorových buňkách  (fyziologický stav).
b) Normální počet chromozómu 11, vyšší počet kopií genu Cyclin D1 (amplifikace).

Další informace

Název produktu

Katalogové číslo

Velikost balení

Cena

Návod na použití

LSI Cyclin D1 (Orange)/CEP11 (Green)

IM_030

200μl

na dotaz

pdf

Literatura

  • Bates S, Peters G: Cyclin D1 as a cellular proto-oncogene. Semin Cancer Biol 1995; 6: 73-82. [fulltext]
  • Courjal F, Louason G, Speiser P, Katsaros D, Zeillinger R, Theillet C: Cyclin gene amplification and overexpression in breast cancer and ovarian cancers: Evidence for the selection of cyclin D1 in breast and cyclin E in ovarian tumors. Int J Cancer 1996; 69: 247-253. [fulltext]
  • Imoto M, Doki Y, Jiang W, Kyu-Ho E, Weinstein IB: Effects of Cyclin D1 overexpression on G1 progression – related events. Exp Cell Res 1997; 236: 173-180.Sherr CI: Cancer cell cycles. Science 1996; 274: 1672-77. [fulltext]
  • Simpson JF, Quan DE, O´Malley F, Odom-Maryon T, Clarke PE: Amplification of CCND1 and expression of its protein product, cyclin D1, in ductal carcinoma in situ of the breast. Am J Pathol 1997; 151(1): 161-168. [fulltext]
  • Terada Y, Okado T, Inoshita S, Hanada S, Kuwahara M, Sasaki S, et al.: Glucocorticoids stimulate p21CIP1 in mesengial cells and in anti-GMB glomerulonephritis. Kidney Int 2001; 59: 1706-16. [fulltext]